为啥western条带都连在一块

你的对照组是什么?对照组有没有出现问题?有问题的话是很可能是你在操作过程中有问题膜的质量是否有问题?再问：对照组没问题。膜是pvdf，质量有么问题？操作怎么不当了？会导致什么？请帮忙分析一下，合理再加

众所周知,太阳发光,地球和月亮自身不发光,月亮是依靠反射太阳光而呈银白色.月亮绕地球公转,而地球又带着绕它公转的月亮一起绕太阳公转.太阳的直径约为140万公里,大约是月亮直径3500公里的400倍.但

没有条带的原因很多：主要原因应该还是一抗的问题,整个流程试剂没有更换的话,就考虑一抗吧.WB的外包公司很多啊介绍一家鼎国昌盛,我在这个公司做过,服务蛮好的.

如果用的Marker有颜色,对颜色.如果是一色的,往往是最小的那个很淡看不清.

erk1/2就表示erk1+erk2分子量分别42,44.也有的抗体只识别其中之一.一般情况下磷酸化不会导致蛋白分子量增加.具体看抗体说明书.CREB容易出两条带原因是CREB和另外一个蛋白同源性太高

不排除是预染Marker质量又问题再问：marker没有问题，实验室其他人做实验就没有问题。因为我是独立出来的，所以实验过程和仪器与他们不是很相同再答：那建议你在适当延长一下转膜的时间吧，三、四个小时

日本自慰队--日本的语言其实是结合了多国的语言好吗?因为日本的很多文字都是“泊来的”,都是用其他国家的文字,再说了,日本的祖先不就是中国人吗?这个回答满意?

凤凰涅磐——只要能忘记曾经,你就能自由.你就能重生.传说,凤凰涅磐,浴火重生.给人的感觉是火焰是凤凰的养料,500年一次,当凤凰的生命快结束时,便会集梧桐枝于自焚,在烈火中新生,其羽更丰,其音更清,其

可能还是转膜的条件问题吧,我和你的抗体一样,蛮好用的,你试试摸索转膜时间吧,可以一个样品多点几个孔,隔段时间就剪一条,摸摸时间

利用样本目的蛋白的光密度比内参照基因条带的光密度,比较不同样本的相对表达率.

1.protein-blot之前用Bradford测一下总蛋白量,估摸一下2.做完第一次后,用photoshop软件测一下各个内参条带的光密度值,这样可以给第二次调整的时候一个参考.

我之前跑PCR也是1···我个人觉得你应该先从引物考虑虽然PCR受很多因素的影响但是引物和退火温度无疑是很重要的两个方面没出现引物二聚体只能说你设计的两端的引物没有错配啊等等你可以找有经验的师兄师姐帮

但即使是这样,WesternBlot得到的条带大小依然会和预计的分子量大小有出入.大部分常见的原因如下：1.翻译后修饰—比如蛋白的磷酸化,糖基化等,这些都会增加蛋白的分子量大小.2.翻译后剪切—比如很

你确定不是跑胶的时候就是弯曲的?建议下次同时跑两块胶,一块转膜,一块考染看看.如果是跑的就是弯曲的,要考虑胶是否均匀,以及拔梳子时是否导致浓缩胶与分离胶平面发生移动等情况.如果确定是转膜时导致的条带弯

做一下考马斯亮蓝染胶看是不是全部转完了.照您的描述,应该是转上了,可能是有点过.也可以做一下丽春红染膜,确认看看是不是转上了.同意黑皮地雷的说法,Marker很容易转上的.

转膜有问题吗?转膜时那些条带有气泡产生吗?请问你做了这些样品对应的actin内参了吗?丽春红染色显示的条带怎样?若内参没问题,是不是你加底物没有弄均匀?你的一抗和二抗什么条件?

左右正确确定上下你放正确了吗,这种现象只能想到这个原因再问：我也没想到其他原因，上下不会有错

可能是一抗和二抗浓度过高了,稀释一下看看吧再问：稀释了以后条带就出不来了啊。。。再答：二抗的浓度呢，有没有稀释，还有注意二抗与一抗的种属关系，必须是相抗的，封闭时间要延长，且摇床的速度不宜过快再问：二

转膜电流太大了,有可能是转过了,建议你用丽春红染下膜,看看蛋白条带是否清晰.我一般用恒压75V,这样子电流只有一百多毫安,差不多也就是五十多KD的蛋白；背景高的话可以加大脱脂奶粉的浓度,用7.5%的,

两层还是两条?两层是你的X光片移动造成的,两条嘛,可能是形成了二聚体,或者蛋白有修饰,或者蛋白被剪切,或者抗体识别其同源性高的蛋白了.