用已知DNA序列设计pcr体系引物

这里有primerblast,使用相当方便,就是网速有点慢

直接发送给我,我帮你设计.

如果是用在原核上,没有多大的却别,但是如果用在真核上,cDNA扩增出来的产物就比DNA直接扩增出来的短.因为cDNA是RNA逆转录过来的,而DNA里面除了RNA上面相对的片段还有内含子的片段,在扩增的

一般未知的序列旁边都有已知的一段吧,就是你说的“修饰片段”?PCR这种flankingsequence可以有很多方法,比如TAIL-PCR,用ADprimer（简并引物）和特异性引物就可以得到目标片段

楼上说的挺有道理,一般pcr反应体系的大小根据扩增的目的来确定,如果扩增后的产物还要用于后续的实验的话就要加大反应体系,50ul或者小体系25多做几管；如果仅仅是为了检测目的条带的话就可以做小体系的如

PCR扩增一般只是扩增上下游两条引物之间的序列.不是.扩增一段序列,就是一段DNA双链,需要两条引物,分别和DNA双链的两条单链的3'端结合,然后扩增出两条引物间的序列.你需要详细了解下PCR的原理,

1.先做序列分析.看是编码序列还是非编码序列.如果是编码序列,则看所编码的蛋白质功能.非编码序列,到Google上搜promoterprediction.然后输入你的序列.可以推测该序列作为promo

去百度百科有

把这段基因输入设计软件里,调节引物位置,使变性温度在94度,退火温度=Tm-（5到10度）延伸温度72度左右,满足这些条件基本就可以了,当然还要根据实际情况多次实验得到最佳引物.如果你要扩增整个的基因

好像用这个软件设计引物的很少吧,我一般都用PrimerPremier5,或者oligo7.这种专业软件很多专业论坛都有说明书下载,比如生物秀、丁香通、生物谷什么的.

由于没起始密码子,所以从左往右写就行,正好30个碱基这道题有两种答案1、如果按它是编码DNA,就写出它的另一条链的碱基序列,然后对照密码子表写出氨基酸序列2、如果按它是非编码DNA,就直接查表写出氨基

引物设计原则：1、长度：15—30bp,其有效长度[Ln=2(G十C)十(A十T)]一般不大于38,否则PCR的最适延伸温度会超过Taq酶的最佳作用温度(74度),从而降低产物的特异性.2、G十c含量

当然可以,您的这两种植物亲缘关系部是很远,没问题的!我们常说的同源克隆都利用的是这个原理,但设计引物的时候需要注意,建议设计兼并引物成功可能性会高一点!

如果你用来PCR的模板是DNA,那么设计引物的时候不需要考虑编码非编码.考虑外显子内含子是在你的模板是cDNA的情况下,也就是转录剪切过了,这个时候cDNA里没有内含子了,那么设计引物就要避开内含子.

这问题都上百度知道来问了,你也是生物专业的研究生吧.PrimerPremier5这个软件设计引物用很不错的.

提出了一种改良的TDT加尾克隆基因5对于基因组测序已经连接载体的PCR是利用已知基因组DNA序列设计的特异引物和载体通用引物进行扩增

PCR的目的是为了扩增目的基因小一点的基因可以直接合成但是大一点的基因就得用PCR扩增了引物是和目的基因的一端互补的单链DNADNN左边一个序列右边一个序列而且DNA的复制只能按照一个方向复制就是由3

根据cDNA序列设计就行了,不用加3‘utr,你做载体构建还是tr-pcr基因检测?再问：做rt-pcr检测。我们老板说要加上3‘utr的序列，不知道为什么？再答：不用加，我做rt-pcr检测那么多了

当然是dna的啦,引物的设计有很多需要注意的地方哦,不然怎么有primer5、oligo7之类设计引物软件呢.

一般来说,RT-PCR的时候很多情况下会不知道模板DNA的序列,可以在Genbank中寻找和你要扩增的物种的亲缘关系较近的物种的同源基因,多找几种,用DNAMAN或其他软件可以比对它们的序列,这样可以