目的蛋白条带不直是什么原因

可能原因很多：1同源蛋白；2表位相似的杂带；3自身蛋白的修饰,糖基化,磷酸化等；4降解再问：那要怎么确认是什么原因造成的呢一共做了三次都出现这种情况再答：先看看旁边的带是多大。和你的同源蛋白大小类似吗

如果实验目的只是基因型鉴定,对PCR产物无其他要求的话,二聚体并非不能忍受,可以尝试以下方法优化反应条件：1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列；2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有

既然其他样本有结果,说明引物没有问题.而该样本GAPDH也有,说明cDNA没有问题.PCR试剂也OK.目的基因在这个样本中表达很低.如果是做定量的话建议用realtime.这样肉眼看不到的也可以由荧光

存在两种可能性,第一,引物设计错误,可以将引物和参考序列进行拼接后看看能不能顺利拼接,以及拼接之后的目的片段长度；第二,可能是非特异扩增,这个时侯如果确定引物位置没有问题,可以调整退火温度,以及PCR

糖尿病伟大的楼主,请务必点“采纳"哦!

可以照胶的时候去调节亮度,对比和γ射线,然后会清楚一些.同时,你优化下PCR扩增条件之类的,提高扩增效率.希望对你有帮助.望采纳.再问：感谢回答，我会试试调节亮度。请问，这跟电泳时使用的染色液有关系吗

用的是T-simple吗?如果不是simple载体,有可能切开的不是你引入的的没切位点,而是载体本身的再问：用的是T-simple啊，发现酶切条带都变大了再答：大了多少？是用的takara的pmd18

erk1/2就表示erk1+erk2分子量分别42,44.也有的抗体只识别其中之一.一般情况下磷酸化不会导致蛋白分子量增加.具体看抗体说明书.CREB容易出两条带原因是CREB和另外一个蛋白同源性太高

可能有很多原因,最常见的原因是1.模板不干净,2.引物设计不当,3.退火温度过高,等等

一般Marker中亮的条带是100ng,其他的条带是50ng.可以看到你回收之后的条带亮度估计在10ng~30ng左右,如果你的上样体积为10ul,则浓度应该是1ng~3ng/ul,这个浓度是很低的,

用这个方法复溶蛋白时很难完全溶解掉,样品处理很是个问题,应该是蛋白浓度不高.我做过类似的也是用这个方法,电泳出条带很浅甚至没有,很郁闷.再问：那你后来是怎么解决这个问题的呢？是bufferB溶解的时候

一个可能原因,DNA结合了蛋白质,所以跑不出去.加loadingbuffer后加热（90度以上）一下再上样试试.另外一个原因,你的产物特别大（不一定是目标产物）再问：我做的是菌落PCR电泳检测结果，我

1、内参没有被扩增出来2、电泳时内参没加loadingbuffer或染料

目的蛋白加上标签蛋白的总分子量,当然会有误差.像GST这种标签很大的,有30kd左右.而FLAG,HIS等都比较小.

阴性对照的作用就是来判断实验是否有污染的,如果PCR条带和阴性对照都弥散的话,原因应该是污染.污染一般有试剂的污染,也有可能是环境的污染.先说试剂的污染.你设置的阴性对照所用的每一种试剂都存在被污染的

恐怕还是cDNA的问题,actin因为量比较丰富,所以即使破坏一些仍能P出来,但你的目的基因就不同了

你是如何知道那条非目的条带也带有组氨酸标签的呢?亲和层析和目的条带一起洗下来的吧?可能是组氨酸丰度较高的杂蛋白,也可能目的蛋白部分降解.要想获得较高纯度的蛋白仅仅用一步亲和层析很难达到.可能试试再加一

可能是菌的基因组DNA,不过基因组DNA是很大的,不只2k还有可能呢,是引物特异性不好,从转入质粒上克隆出了你的目的片段,但从菌基因组或者质粒序列上扩出来一个非特异

PCR条带不够亮,说明扩增效率不高.一方面可能是你的引物设计的不够好,导致扩增效率低；二是引物的退火温度,你可以做个温度梯度PCR摸索下最佳退火温度,这样可以提高引物扩增效率.三是,DNA模板,浓度过

你确定不是跑胶的时候就是弯曲的?建议下次同时跑两块胶,一块转膜,一块考染看看.如果是跑的就是弯曲的,要考虑胶是否均匀,以及拔梳子时是否导致浓缩胶与分离胶平面发生移动等情况.如果确定是转膜时导致的条带弯