真核基因在大肠杆菌表达系统中容易出现哪些问题,如何解决

真核生物基因为不连续基因,即基因里面既还有外显子序列,又含有内孩子序列!一般情况下,外显子是编码蛋白质的,内含子是不编码蛋白质的,但是在转录起始时,外显子和内含子都是转录的,合成的前体称之为核不均一R

答：要使动物中编码激素的基因在大肠杆菌中表达,通常遇到的问题有：(1)细菌的RNA聚合酶不能识别真核生物的启动子.(2)大多数真核基因有内含子,这些内含子在转录后从前体mRNA中被切除而形成成熟mRN

一般程序如下：获得目的基因－准备表达载体－将目的基因插入表达载体中（测序验证）－转化表达宿主菌－诱导靶蛋白的表达－表达蛋白的分析－扩增、纯化、进一步检测.[主要试剂主要试剂]主要试剂1、LB培养基.2

真核基因是可以在大肠杆菌中表达的.比如现在美国的公司用在大肠杆菌中导入人的胰岛素基因,使其表达,合成胰岛素.原理很简单1.表达载体要有大肠杆菌能够识别的启动子、SD序列就行,就好像是一段大肠杆菌本身的

因为大肠杆菌是单细胞生物,所以既是细胞层次,也是个体层次.

三种都是一类的题目!1、收集目的基因的mRNA(因为没得内含子),然后用各自特异的引物进行RT-PCR扩增目的基因（也就是水通道蛋白基因,猪的生长素基因和植物生长激素的基因）!2、限制酶切载体（比如E

原核细胞中缺乏高尔基体等细胞器,无法将多肽变成具有一定空间结构的蛋白质.此外,原核生物的基因中不含内含子,真核生物基因中存在内含子.内含子是真核生物细胞DNA中的间插序列.这些序列被转录在前体RNA中

1.表达载体要有合适的启动子、SD序列等.2.去掉内含子.一般用cDNA.不过真核生物在大肠杆菌中表达会存在无法对翻译好的蛋白质进行修饰的问题,这样使得这些蛋白质不具有活性

表达,用试剂盒检测吧.

现在有很多商品化的原核表达载体,比如pET系列,含有原核启动子,终止子相同,不需要考虑SD序列,载体启动子中都有了.将真核基因编码框（CDS）序列重组进载体,转化大肠杆菌就可以表达了.表达产物没有糖基

人是真核生物,大肠杆菌属于原核生物,真核生物的基因是不能在原核生物中直接表达的,在基因转移的过程中,必须在转座子中或转移基因的片段边缘加入相应的修饰片段,协助外源基因,才能得以表达

1.真核基因多含有内含子,在原核细胞内,无法将内含子剪掉.合成的蛋白质就就不是正确的氨基酸序列,也无法折叠形成正确的空间结构（高级结构）.而正确的空间结构是维持蛋白质生物学活性必不可少的.变性的蛋白质

第一,克隆到原核表达系统中的序列必须是去掉内含子的cDNA序列.因为原核表达系统没有剪切修饰内含子的相关酶系统.第二,要用原核的启动子.检查一下真核基因密码子偏好是否存在原核表达系统的稀有密码子.那个

没有问题,植物的基因可以在动物中表达,动物的基因也可以在植物之中表达,蛋白质的序列和性质变化不大,但是糖基化修饰不同.如果要表达做一下密码子优化会增加表达量.

基因工程所用大肠杆菌表达真核基因都是cDNA序列,也就是没有内含子的.最大的困难在于有很多真核基因表达的蛋白翻译后修饰.大肠杆菌内没有特定的分子伴娘,没有磷酸化修饰酶等等,往往造成得到的蛋白没有活性.

转录翻译基因--------RNA-----------蛋白质

大肠杆菌往往是用来对目的基因进行储藏的体系进行表达往往不用他因为每种生物对待一种氨基酸的密码是不同的是有偏爱的你也知道有很多氨基酸的密码子不止是一个当A生物的DNA片段导入B生物（表达体系）中假如AB

1.在猪身上采一块样品（耳朵）,提取基因组.2.在NCBI上查找相关基因的信息,设计引物.3.以提取的基因组为模板,加入引物进行PCR反应.（要用taq酶）4.将产物进行胶回收,回收目的片段.5.将目

由于CHO-dhfr-细胞自身缺失二氢叶酸还原酶（dhfr）,无法自身合成四氢叶酸,所以必须在添加了次黄嘌呤（hypoxanthine）、胸腺嘧啶（Thymidine）和甘氨酸的培养液中才能得以存活.

最直接方便.也可以提取菌液中的质粒以质粒为模板来扩增复杂而且浪费但是菌体检测也只是初步的.