胶回收产物不连A可以连接T载体
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/12 01:11:57
ts连起来发作[ts]的音,这个在国际音标图中是有的,发音的声音和汉语拼音中的c差不多(注意是“吃”的那个c)changes[tʃendʒz]bridges['bridʒ
.同步双酶切同步双酶切是一种省时省力的常用方法.选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步.NEB每一种酶都随酶提供相应的最佳NEBuffer,以保证100%的酶活性.NEBuffer的组成及
套丝然后找螺母
这个是可以的,只是效率不高
T载体分两种.一种是末端带有A的典型的T载体,这样的T载体可以与taq酶扩增出来的片段连接,另一种是平末端的T载体,这种T载体末端没有A,它用于以pfu或者是phusion这样的高/超保真酶扩增出来的
用的是T-simple吗?如果不是simple载体,有可能切开的不是你引入的的没切位点,而是载体本身的再问:用的是T-simple啊,发现酶切条带都变大了再答:大了多少?是用的takara的pmd18
恩就是质粒感受态的大肠杆菌把T载体转进去然后摇菌培养这样载体就会随着菌的扩增而扩增然后就可以提质粒拿去测序或者别的后续实验因为连接完的载体浓度是很小的
"排除浓度太淡"?怎么排除的?试剂盒用时间长了效果可能变差,或者本来产物的量就不高.如果不是浓度问题,会不会是电泳的问题,电泳缓冲液是不是该换了,EB是不是失效了等等.
PCR产物纯化试剂盒去除的是PCR反应体系中的离子、dNTP、引物以及聚合酶,收集其中的DNA片段.这只适合于几乎没有非特异性条带的PCR产物的收集.如果你的PCR产物具有非特异性条带,那么一定需要使
下列哪一列是可以分类回收A.回收废塑料C.回收废纸!
一片亮,一般是样品处理或者配胶的时候不注意,混入了一些内切酶,或是电泳温度高,导致核酸降解,尤其是跑RNA电泳,很容易这样.建议用新胶,新TBC(TAC)重新跑一次,样品用醋酸铵重新纯化,电泳槽用缓冲
当然先筛选,再做个目的基因PCR检测,找出阳性产物,测序对比无误后再转入细胞喽
理论上讲PCR产物可以直接酶切连接反应.但是,以PCR产物酶切的时候没有办法证明双酶切是否成功、彻底(PCR产物会有ployA的存在必须切掉,但是PCR产物和酶切产物大小差别不大).而以T载体为媒介,
我理解楼主的问题是这个样子.在连接之后的筛选其实是分两步的.第一步是筛选出含有载体标记基因的连接产物,这样的产物可能有载体-目的基因连接和载体-载体连接,利用的一般是载体上的标记基因的抗性培养(一般的
我觉得你这个问题有错误,载体连接蛋白然后表达蛋白?你所说的转基因表达,应该是表达外源基因得到想要的目的蛋白?是这样吗?那是这样的话,你这里的载体就是基因克隆载体,这个就很多了!1-根据你外源基因的来源
不是…一种是需要的产物,一种是切开以后又合上了,等于没切.还有一种是载体载体连接的,就是两个载体连在一起的特殊产物再问:那这种在培养基上也能生长,如何筛选?再答:这种可以用与筛选未被切开的载体相同的方
连到载体后扩增有好处:载体相对于基因组或cDNA复杂度降低,扩增出的片段纯度比较高,而且循环数可以很低,如20-25循环切忌用载体扩增时用高循环,否则会有大量smear引物肯定需要加的!mg2+倒可以
虽然你的问题写的乱七八糟,但是我还是回答一下:(2)含tctR重组质粒.含ampR重组质粒.回答你最后的问题:因为这些宿主细胞内已经包含有重组质粒,重组质粒DNA可以表达出相应分解四环素或者青霉素的酶