艾弗里提取的DNA纯度达不到百分之一百
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/06 20:52:20
先配成98毫升加2毫升样品,在分光光度计下测OD260的波长和OD280的波长,两者相除既是
保持基因组DNA的完整性防止其断裂,使其与核蛋白充分解离,防止抽提蛋白质时DNA流失防止RNA污染能力有限,目前就想到这些,不知道还有没有别的
溶解,过滤,降温结晶加水搅拌,碳酸钾可溶于水,过滤除去不溶性杂质
a)磁珠法中的细胞裂解液是一种蛋白变性剂,可使动植物的细胞裂解,并使与DNA结合的蛋白质变性,DNA游离释放,磁球可以特异地吸附DNA,通过洗涤,去除DNA以外的RNA、蛋白质等杂质,再因洗脱液解离吸
制备鸡血细胞液沉淀后去上清——放入清水中吸水涨破——过滤去细胞碎片留虑液——加2MOL/LNaCl——使DNA析出——过滤去滤液——2mol/LNaCl再溶解——过滤去多余DNA——加体积分数95%冷
你说的是粗提取吧?注意事项:first实验材料不能用猪血代替鸡血,因为哺乳动物成熟红细胞木细胞核儿~~second制备鸡血细胞液时,注意向鸡血中加入柠檬酸钠,防止血液凝固3搅拌时沿一个方向搅拌4使细胞
你取出1微升或2微升,用EB稀释100倍或50倍到100微升,OD260/280的比值在1.8-2.0是比较理想的,代表你的DNA纯度很高.波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/m
用核酸定量分析仪器测下,如果是1.8左右就可能比较纯不纯的话用相应的方法抽提蛋白和RNA
如果是普通分光光度计,那就需要一个试剂盒,不过我不知道质粒应该用什么样的,可以去生物公司销售人员问一下.具体操作步骤:1、按照试剂盒说明书配出待测液.2、常规分光光度计使用方法,很多人都会.主要步骤包
用酚氯仿再次抽提.若对去除基因组DNA有要求,那么用核酸外切酶处理.再问:能不能再详细点???谢谢
质粒DNA提取一般用沸水浴法和碱裂解法,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用,它主要是将细胞内的环状质粒提取出来,一般需要用SDS裂解,RNA酶降解,然后过柱,再进行洗脱.过程比较简单.而基因组DN
据我自己的经验,这种情况往往是由于操作不当引起,可能有如下原因:1,菌体量可能过大,裂解不充分,或裂解液与中和液比例不适当;(调整菌液量或缓冲液量)2,混合时过于剧烈,可能会带来基因组DNA片段的污染
1,研磨要充分2,纯化的时候小心点不要吸取杂质以提高纯度详细的可看我们团队的贴吧,里面有专门的贴子,也可以来讨论
【1】肺炎双球菌转化实验艾弗里的不足是实验提取的dna纯度不足不能排除蛋白质的作用可是他不是已经做了加入DNA酶和DNA的实验了吗为什么还不足?答:当时人们可不这么想,人们只认准了DNA不纯.【2】答
简单一点的,直接沸水煮一下;CTAB裂解法,酚氯仿抽提等,很多种
从血液中
请查找CTAB法,或者玻璃珠法,还可以咨询试剂公司,现在的商业化产品线很丰富了
很有可能有蛋白,或许其它的东东,你最好测260nm.280nm230nm处od,看看他们的比值,才好判断到底是什么被污染了.因为蛋白的吸收峰是280nm.纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0
真菌的细胞成分和植物是有差别的,这种专一性的植物DNA提取试剂盒不一定能提好真菌的DNA.如果有条件你最好是买专一性的真菌DNA提取试剂盒.不过植物DNA提取的CTAB法确实可以适用于真菌的DNA提取