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24孔板里293细胞转染,总是后面的孔里细胞死亡,何故?

来源:学生作业帮 编辑:搜狗做题网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/04/27 19:41:22
24孔板里293细胞转染,总是后面的孔里细胞死亡,何故?
我在24孔板里做293细胞的转染,转染试剂是Invitrogen的Lipofectamine2000.奇怪的是,每次加完DNA- Lipofectamine complex,24个孔当中的后面几个孔(比如最后6个孔)里的细胞就明显有一部分死亡,死亡率是10-30%,通常最严重的是最后两个孔.但是前面的孔里的细胞总是没有问题.用不同的DNA做实验,都发生同样的问题,就是总是后面的孔里细胞死亡,而前面的孔里细胞没问题.是怎么回事呢?
24孔板里293细胞转染,总是后面的孔里细胞死亡,何故?
博凌科为也遇到过类似的情况,如果你在加DNA-Lipofectamine complex时孔板里是没有液体的,会在风机下风干的,很快的,这样你在加到后面的孔时,部分细胞已经干了,所以你先加的很好,后面的就有问题.解决办 法就是,你不要一起吸净所有孔的液体,6个孔为一个单位,吸弃孔里的液体,在加DNA-Lipofectamine complex,就可以了.