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想测试一个基因的MRNA表达量,用什么方法最好?如果是原位杂交和免疫组化是不是定量不准?那RT-PCR呢?还有什么方法?

来源:学生作业帮 编辑:搜狗做题网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/06/25 19:32:29
想测试一个基因的MRNA表达量,用什么方法最好?如果是原位杂交和免疫组化是不是定量不准?那RT-PCR呢?还有什么方法?
想测试一个基因的MRNA表达量,用什么方法最好?如果是原位杂交和免疫组化是不是定量不准?那RT-PCR呢?还有什么方法?
对于基因蛋白表达的定量一般不会用到原位杂交和免疫组化,这两个方法的优点是更加直观,但定量困难,适合用作定性实验.个人认为定量实验检测最好用RT-PCR进行核酸层面的检测,或者用免疫学方法直接检测蛋白量,比如ELISA等;蛋白电泳(包括2D)可以进行半定量的实验.另外定量实验要注意的是选择合适的内参,电泳要注意平衡好上样量.