考马斯亮蓝法测定蛋白的方法学验证,在做准确度验证时,为什么在浓度越高反而回收率越低?

来源：学生作业帮编辑：搜狗做题网作业帮分类：综合作业时间：2024/05/16 05:12:29

考马斯亮蓝法测定蛋白的方法学验证,在做准确度验证时,为什么在浓度越高反而回收率越低?
主要是考马斯亮蓝法对纤维蛋白原蛋白含量测定方法学验证,标准曲线相关性都不错,一般都有0.997以上,可是在测定纤维蛋白原蛋白含量的准确度验证时,浓度越高反而回收率越低,1.25ug/ml时回收率有95%左右,可是到8ug/ml时,则降到了74%,做了好几次,都是这个趋势,浓度越高回收率越低,哪位能够帮我分析一下,

首先,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量时,准确度是由一定范围的,浓度超出范围肯定不准.另外,你在8ug/ml时的收率74%是否稀释测定?最后,高浓度和低浓度回收效率也是有一定范围的,低了高了都不好,最佳回收效率也是在适当浓度下,如果你有兴趣可以做一下梯度实验来证实我的判定.希望能给您帮助.
再问：嗯，考马斯亮兰法的微量测定范围在1-10ug/ml,准确度我选择的测定浓度是1.25 3 5 6.5 8ug/ml,都在范围内，且样品的浓度都是通过稀释得到的。还有就是回收率的范围该如何确定，以及准确度检测浓度该如何选择？？？？
再答：回收率可以通过不同蛋白浓度下检测回收率，比如你做的1.25ug/ml时回收率有95%左右，8ug/ml时为74%，由此你可以在1.25ug/ml左右浓度设计，比方0.1-8ug/ml都可以，安排几个浓度梯度，主要分析0.1-1.25ug/ml和1.25-8ug/ml这两个范围回收率是什么样的变化情况。之后，确定在哪个浓度下回收率最佳，重复几次后统计学分析，最后通过图表反应，加上误差棒，这就是一个可以写进论文的完整的实验内容了。

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