细菌总DNA怎样提取和鉴定?

来源：学生作业帮编辑：搜狗做题网作业帮分类：生物作业时间：2024/04/30 16:14:50

细菌总DNA怎样提取和鉴定?

细菌总DNA的提取 1. 将菌株接种于液体LB培养基,37℃震荡培养过夜. 2. 取1.5ml培养物12000rpm离心2min. 3. 沉淀物加入567 ul的TE缓冲液,反复吹打使之重新悬浮,加入30ul 10%SDS和15ul的蛋白酶K,混匀,于37℃温育1h. 4. 加入100ul 5mol/L NaCl, 充分混匀,再加入80ul CTAB/NaCl溶液,混匀后再65℃温育10min. 5. 加入等体积的酚/氯仿/异戊醇混匀,离心4-5min, 将上清转入一只新管中,加入0.6-0.8倍体积的异丙醇,轻轻混合直到DNA沉淀下来,沉淀可稍加离心. 6. 沉淀用1ml的70%乙醇洗涤后,离心弃乙醇,在洁净工作台中稍加干燥,重溶于20ul TE缓冲液(含RNaseA﹤25ng/ml)中,准备电泳检测. 生物帮上面有详细的步骤可以去了解下, http://www.bio1000.com/zt/experiment/219742.html qpcr,实时定量pcr,荧光pcr,实时荧光定量pcr检测步骤,分析,实时荧光定量pcr技术应用,实时荧光定量核酸扩增检测系统,实时定量基因扩增荧光检测系统,qpcr试剂盒, 实时荧光定量PCR仪,qpcr引物设计.

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