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组织蜡块如何提取RNA

来源:学生作业帮 编辑:搜狗做题网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/04/28 08:00:00
组织蜡块如何提取RNA
组织蜡块如何提取RNA
1楼存在错误,因为是组织蜡块在使用Trizol法之前,应该先用二甲苯去除石蜡.
用过Trizol法效果不是很好,建议用QIAGEN试剂盒FFPE RNA提取试剂盒.QIAGEN试剂盒毕竟是全世界核酸提取的老大.
再问: 前面我以用过Trizol法提细胞的RNA。主要是不知道该如何除去石蜡。上周我用环保型的脱蜡剂脱蜡,再用酒精梯度洗脱去除残余的试剂,最后用Trizol法提取。但是结果提出来的RNA测浓度才十几个纳克。所以在此想求教一下脱蜡的具体步骤。
再答: □ 加入1ml二甲苯,涡旋振荡10s □ 离心,12000rpm×2min,弃上清 □ 加入1ml无水乙醇,充分混匀 □ 离心,12000rpm×2min,弃上清 □ 静置10min,挥发乙醇 就可以去除石蜡了,按你所说还忽略了一点,你还应该加入蛋白酶K,消化组织,使细胞从组织中游离出来,否则提不到RNA和DNA。总之,用Trizol法提取组织RNA的效果不是很好,建议用比较好的试剂盒,我只用过QIAGEN试剂盒FFPE RNA提取试剂盒,效果很不错,所以只能给你这个建议。