pUC19连接了大于3kb的片段,提取质粒时质粒变小了,丢了600bp,这样我就测不到目的基因序列,怎么办?

我已经有含有目的基因的T质粒了,怎样构建表达载体啊? 假如目的基因插入了质粒的四环素抗性基因中,筛选含目的基因的细胞,这个质粒还含有抗氨苄霉素基因. 限制行内切酶切割质粒和目的基因后,目的基因是怎么和质粒连接的? 提取的质粒跑电泳出来带很杂,目的片段1700bp,用的是pMD19—T载体,从左往右第三泳道和第九泳道是空质粒 细菌质粒提取的目的 目的基因片段与载体质粒的选择? 质粒和目的基因片段分别双酶切（bamh1,xba1）连接后电转感受态细胞,同时将质粒酶切回收的片段转化做对照 质粒与目的基因连接得到几种重组质粒 质粒与目的基因的连接产物是? 可以用构建好的插入了目的基因的表达载体重组质粒做southern吗 RT 已经获得了载体质粒和目的基因,把他们结合获得重组体的实验怎么做? 如果我把目的基因连接到质粒载体上,这个载体质粒又有多个启动子,我怎么知道它用那个启动的呢