SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质的实验中.当分离胶加完之后为什么需要在上面加一层水呢?电极缓冲液中甘氨酸的作用是
来源:学生作业帮 编辑:搜狗做题网作业帮 分类:化学作业 时间:2024/05/13 08:20:35
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质的实验中.当分离胶加完之后为什么需要在上面加一层水呢?电极缓冲液中甘氨酸的作用是什么呢?样品液为何要在加样前沸水加热几分钟?电泳后正负极槽内电泳缓冲液ph值将怎样改变呢?
加一层水称为水封
目的是隔绝空气使催化反应快速进行,进而形成凝胶,还可使分离胶上沿平直.
并且加水后,保持分离胶表面的平整性,使浓缩胶和分离胶都处于同一水平面上.
甘氨酸是为了解离出甘氨酸根离子,甘氨酸根离子可以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩在一起.
样品液煮沸这个问题我个人认为是可以商榷的,因为理论上煮沸可以使SDS和蛋白更快更好的结合,以便于SDS-PAGE的进行.但是有些蛋白似乎不煮沸直接上样结果更好.对于非还原Loading buffer(即不含巯基乙醇)的样品,一般是不要煮沸的.
长时间的电泳会使正极变酸,负极变碱.
目的是隔绝空气使催化反应快速进行,进而形成凝胶,还可使分离胶上沿平直.
并且加水后,保持分离胶表面的平整性,使浓缩胶和分离胶都处于同一水平面上.
甘氨酸是为了解离出甘氨酸根离子,甘氨酸根离子可以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩在一起.
样品液煮沸这个问题我个人认为是可以商榷的,因为理论上煮沸可以使SDS和蛋白更快更好的结合,以便于SDS-PAGE的进行.但是有些蛋白似乎不煮沸直接上样结果更好.对于非还原Loading buffer(即不含巯基乙醇)的样品,一般是不要煮沸的.
长时间的电泳会使正极变酸,负极变碱.
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质的实验中.当分离胶加完之后为什么需要在上面加一层水呢?电极缓冲液中甘氨酸的作用是
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的实验中.当加完分离胶后,为何要在其上加一层水?
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