搜狗做题网帮我看看pcr反应条件
来源：学生作业帮 编辑：搜狗做题网作业帮 分类：综合作业 时间：2024/06/17 07:48:26
帮我看看pcr反应条件
在文献上看了两个条件：
1、预变性94度5分钟,变性94度1分钟,67度退火1分钟,72度延伸1分钟,72度7分钟,30个循环；
2、预变性95度2分钟,变性94度30秒,67度退火1分钟,72度延伸45秒,72度9分钟,30个循环；
对同一标本,分别用这两个条件扩增,结果不太一样,想知道问什么?
引物的TM：
R:66.45度（0.05M钠离子)；75.73度（1M钠离子)；
F:69.24度（0.05M钠离子)；78.28度（1M钠离子)；
在文献上看了两个条件：
1、预变性94度5分钟,变性94度1分钟,67度退火1分钟,72度延伸1分钟,72度7分钟,30个循环；
2、预变性95度2分钟,变性94度30秒,67度退火1分钟,72度延伸45秒,72度9分钟,30个循环；
对同一标本,分别用这两个条件扩增,结果不太一样,想知道问什么?
引物的TM：
R:66.45度（0.05M钠离子)；75.73度（1M钠离子)；
F:69.24度（0.05M钠离子)；78.28度（1M钠离子)；
会有所不同,变性的时间与退火时间的不同会影响PCR的反映结果,较多的变形时间与延伸时间可以使产物的量增加,要说跑出的条带不同基本不会.
建议你再做一遍,怀疑有污染
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