搜狗做题网pcr退火温度高特异性强,为什么?..低 非特异多 为什么?
来源：学生作业帮 编辑：搜狗做题网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/06/23 23:19:34
pcr退火温度高特异性强,为什么?..低 非特异多 为什么?
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DNA的双链主要是靠氢键联系在一起.
退火温度越高,断开氢键的热能越大,引物与模板越不易结合,反之,退火温度越低,越容易形成氢键,进行退火.
所以当温度高时,只有碱基匹配程度高的,也就是模板与引物形成配对数越多的引物,才能结合到模板上,这样扩增出来的条带最少,甚至只有一条,也就是引物和目的序列的完美匹配,因此特异性越高.
反之,若退火温度低,引物和模板匹配低时,也能稳定存在,那么模板上可能存在很多区域能和引物上的少量碱基匹配,进行引发,因此dna条带会很多,非特异带增加.
特异带是指你的目的带.非特异带是pcr中扩增出的非目的带.
退火温度越高,断开氢键的热能越大,引物与模板越不易结合,反之,退火温度越低,越容易形成氢键,进行退火.
所以当温度高时,只有碱基匹配程度高的,也就是模板与引物形成配对数越多的引物,才能结合到模板上,这样扩增出来的条带最少,甚至只有一条,也就是引物和目的序列的完美匹配,因此特异性越高.
反之,若退火温度低,引物和模板匹配低时,也能稳定存在,那么模板上可能存在很多区域能和引物上的少量碱基匹配,进行引发,因此dna条带会很多,非特异带增加.
特异带是指你的目的带.非特异带是pcr中扩增出的非目的带.