基因工程中的α互补和蓝白筛选的原理
来源:学生作业帮 编辑:搜狗做题网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/06/16 07:22:26
基因工程中的α互补和蓝白筛选的原理
![基因工程中的α互补和蓝白筛选的原理](/uploads/image/z/15092869-13-9.jpg?t=%E5%9F%BA%E5%9B%A0%E5%B7%A5%E7%A8%8B%E4%B8%AD%E7%9A%84%CE%B1%E4%BA%92%E8%A1%A5%E5%92%8C%E8%93%9D%E7%99%BD%E7%AD%9B%E9%80%89%E7%9A%84%E5%8E%9F%E7%90%86)
E.coli DH5α菌株带有β-半乳糖苷酶C端部分序列的编码信息.
载体质粒DNA 上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸的编码序列.(这个编码区中插入了一个多克隆位点,但并没有破坏lacZ的阅读框架,不影响其正常功能.)
在各自独立的情况下,载体质粒DNA和DH5α编码的β-半乳糖苷酶的片段都没有酶活性.但在载体质粒DNA和DH5α融为一体时可形成具有酶活性的蛋白质.
这种lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酸阴性突变体之间实现互补的现象叫α-互补.
载体质粒DNA 上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸的编码序列.(这个编码区中插入了一个多克隆位点,但并没有破坏lacZ的阅读框架,不影响其正常功能.)
在各自独立的情况下,载体质粒DNA和DH5α编码的β-半乳糖苷酶的片段都没有酶活性.但在载体质粒DNA和DH5α融为一体时可形成具有酶活性的蛋白质.
这种lacZ基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β-半乳糖苷酸阴性突变体之间实现互补的现象叫α-互补.