【求助/交流】目的基因与表达载体连接时有哪些要点?

来源：学生作业帮编辑：搜狗做题网作业帮分类：综合作业时间：2024/06/16 11:56:55

2.片段和载体酶且要完全,确定大小没问题
不过有些载体本身就很很难连接!
建议在连接时,先加入载体和目的基因,85度热浴15min,除去残留的酶和未纯化干净的杂蛋白.然后再加入酶和BUFFER.
适当延长连接时间24小时以内都没问题的!
如果还是不行,就试试对载体去磷酸化,每一步处理都要在结束后热变性,失活残留的酶,适当加大目的基因的量（10以内）,连接温度也可以在4-16度内用PCR做个梯度!不过如果有平末端的,就不用做这个梯度了.dfdxhghg(站内联系TA)我们只做医学论文,所以更专业!我们全部的工作人员均来自医学院校和附属医院,全部拥有硕士以上学历,有丰富的论文写作经验.做医学论文,我们有比其他公司无法比拟的优势!很多论文公司的人员根本不懂医学,医学论文等专业知识上面很难沟通和探讨.

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