搜狗做题网鸡胚成纤维细胞培养实验的步骤
来源：学生作业帮 编辑：搜狗做题网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/06/22 10:54:10
鸡胚成纤维细胞培养实验的步骤
我想要的是实验过程中的步骤，加什么试剂，做什么样的处理
我想要的是实验过程中的步骤，加什么试剂，做什么样的处理
成纤维细胞一般都很好养的.注意灭菌和观察培养液颜色变化,及时更换.检查培养箱有没有受到污染.最好自己灭菌比较放心.
强烈推荐来这下载,很不错的一篇肝细胞应用分析论文：
可 实 验 发现,从STO饲养层培养的ICM 细胞
分离的胚胎干细胞嵌合力、存活率均低于PMEF,
且核型异常的ES细胞的比率比PMEF的高.不同
动物的胚胎对饲养层的选择不同,羊全胚或分离的
1CM在STO上不扩展,在同源胚胎成纤维细胞上
能扩展,但未得到ES细胞.猪全胚或分离的ICM
只有在STO或STO+BRL(大鼠肝细胞饲养层)一
CM 上能附着增殖,并迁移到饲养层上形成类ES细
胞.山羊和绵羊的类ES细胞只能用BFLF(胎牛肝
成纤维细胞)分离得到.鸡的PGCs培养在STO饲
养层和LEFs鸡胚成纤维细胞)上,7^-10 d就可传
代一次.
3.2 早期胚胎及基本培养基的选择和外源性物质
的添加
以下 的 早 期胚胎都可作为建立ES细胞系的材
料:牛的桑棋胚(6-7日龄),囊胚(7^-8日龄);山羊
的囊胚(7^-8日龄);绵羊的囊胚(7^-9日龄);猪的
囊胚(7^10日龄);兔的囊胚(4^-5日龄)等.而对
PGCS来说,牛取29^-35 d胚胎生殖蜻,猪取23-
25 d胚胎生殖岭等.
ES 的 基 本培养基一般采用】〕MEM,因为它比
较适用于生长速度快、呈集落生长而又贴壁性差的
细胞.由于DMEM的各种成分不一定能保证ES细
胞处于最佳生长状态,因此还需添加一定的外源性
物质,如p-琉基乙醇、硒酸钠、非必需氨基酸和生长
因子等物质.p一琉基乙醇可促进胚胎细胞的分裂增
殖,并促进DNA的合成,防止过氧化物对培养细胞
的损害,促进胚胎贴壁.硒酸钠是一种附加的营养成
分,是细胞生长所必需的.1993年Sims等在培养牛
的ES细胞过程中加人硒酸钠后提高了传代过程中畜禽胚胎千细胞的应用价值及前景分析
199 9 年 ,美国《科学》杂志将ES细胞研究成果
评为该年度世界十大科技进展之首,可见人们已预
见到干细胞尤其是ES细胞在医学乃至整个生命科
学中的巨大发展潜力.
4.1 ES细胞是细胞分化和发育生物学研究的重要
材朴
利用 ES 细胞的多潜能性,能诱导ES细胞发生
定向分化.类视素(又称维生素A酸)能诱导ES细
胞分化成体壁内胚层,NGF(神经生长因子)又能使
之分化成神经细胞,而LIF,DIA等细胞因子却能使
之保持未分化状态,或分化成中胚层.而细胞分化又
是发育生物的重要课题,因此诱导分化必将为发育
生物学中细胞分化的决定作用以及恶性肿瘤的深人
研究提供新的材料和思路.而且如果用胚胎干细胞
进行实验.就可以避开许多障碍,直接观察细胞的分
化、发育的荃因调控,推动理论科学的发展.
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可 实 验 发现,从STO饲养层培养的ICM 细胞
分离的胚胎干细胞嵌合力、存活率均低于PMEF,
且核型异常的ES细胞的比率比PMEF的高.不同
动物的胚胎对饲养层的选择不同,羊全胚或分离的
1CM在STO上不扩展,在同源胚胎成纤维细胞上
能扩展,但未得到ES细胞.猪全胚或分离的ICM
只有在STO或STO+BRL(大鼠肝细胞饲养层)一
CM 上能附着增殖,并迁移到饲养层上形成类ES细
胞.山羊和绵羊的类ES细胞只能用BFLF(胎牛肝
成纤维细胞)分离得到.鸡的PGCs培养在STO饲
养层和LEFs鸡胚成纤维细胞)上,7^-10 d就可传
代一次.
3.2 早期胚胎及基本培养基的选择和外源性物质
的添加
以下 的 早 期胚胎都可作为建立ES细胞系的材
料:牛的桑棋胚(6-7日龄),囊胚(7^-8日龄);山羊
的囊胚(7^-8日龄);绵羊的囊胚(7^-9日龄);猪的
囊胚(7^10日龄);兔的囊胚(4^-5日龄)等.而对
PGCS来说,牛取29^-35 d胚胎生殖蜻,猪取23-
25 d胚胎生殖岭等.
ES 的 基 本培养基一般采用】〕MEM,因为它比
较适用于生长速度快、呈集落生长而又贴壁性差的
细胞.由于DMEM的各种成分不一定能保证ES细
胞处于最佳生长状态,因此还需添加一定的外源性
物质,如p-琉基乙醇、硒酸钠、非必需氨基酸和生长
因子等物质.p一琉基乙醇可促进胚胎细胞的分裂增
殖,并促进DNA的合成,防止过氧化物对培养细胞
的损害,促进胚胎贴壁.硒酸钠是一种附加的营养成
分,是细胞生长所必需的.1993年Sims等在培养牛
的ES细胞过程中加人硒酸钠后提高了传代过程中畜禽胚胎千细胞的应用价值及前景分析
199 9 年 ,美国《科学》杂志将ES细胞研究成果
评为该年度世界十大科技进展之首,可见人们已预
见到干细胞尤其是ES细胞在医学乃至整个生命科
学中的巨大发展潜力.
4.1 ES细胞是细胞分化和发育生物学研究的重要
材朴
利用 ES 细胞的多潜能性,能诱导ES细胞发生
定向分化.类视素(又称维生素A酸)能诱导ES细
胞分化成体壁内胚层,NGF(神经生长因子)又能使
之分化成神经细胞,而LIF,DIA等细胞因子却能使
之保持未分化状态,或分化成中胚层.而细胞分化又
是发育生物的重要课题,因此诱导分化必将为发育
生物学中细胞分化的决定作用以及恶性肿瘤的深人
研究提供新的材料和思路.而且如果用胚胎干细胞
进行实验.就可以避开许多障碍,直接观察细胞的分
化、发育的荃因调控,推动理论科学的发展.