对于一段有重复序列的片段如何扩增,只是一个基因的中间的部分序列,准备扩增做overlap.

来源：学生作业帮编辑：搜狗做题网作业帮分类：语文作业时间：2024/05/14 19:47:19

对于一段有重复序列的片段如何扩增,只是一个基因的中间的部分序列,准备扩增做overlap.
我在两端设计的无配对引物,无法扩增目的条带,不知对PCR 条件有什么要求?

1.如果是非特异性扩增引起的无法扩增目的条带,那么可以提高退火温度,或者换酶,或者先切胶回收较浅的目的条带,再次扩增
2.如果退火温度太高,可以用两步法扩增
3.如果引物GC值太高,可以加DMSO
再问：条带很弥散，用的是kod-plus-neo，提高退火温度了，直接用两步法的，但是还是不行，还利用了step down也没有扩增出来。
再答：怎么个弥散法？目的条带大小的地方有条带吗？
再问：恩，是有的。但是回收后再次扩增还是出现同样的问题，我的QQ是765586487，可以像你请教一下吗？

对于一段有重复序列的片段如何扩增,只是一个基因的中间的部分序列,准备扩增做overlap. 知道一个基因两端的序列,中间有一段未知,用哪种PCR法把未知片段扩增出来啊? 引物是否只是PCR扩增中的目标链,它与扩增产生的DNA链序列有什么区别? 如何在NCBI上寻找要扩增的序列? PCR 所扩增出的DNA序列是不是只是模板DNA序列中的一部分? 如何在GeneBank登录序列?我现在有几个自己扩增得到的基因序列,想把它们登录到GeneBank,该从哪申请登录如果要使用PCR扩增一段已知的DNA序列,要如何设计引物 pcr扩增出来的东西与模版dna完全一致吗?还是说只扩增出模版中的某一段序列（我们需要的基因片段）? 使用PCR扩增以下DNA模版中的基因1,需要的一对引物序列是一段DNA序列为：acgttgatgcaggtg.cgtgcagaacaggct,可用于PCR扩增的引物对是：测序结果怎么找不到我的扩增引物序列? 性染色体只存在于生殖细胞队吗?还有为什么pcR技术扩增目的基因前要已知一段目的基因的核苷酸序列呢