分子生物学的研究方法,名称和原理及应用此方法所达到的目的是什么?
来源:学生作业帮 编辑:搜狗做题网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/04/30 20:54:49
分子生物学的研究方法,名称和原理及应用此方法所达到的目的是什么?
分子生物学与神经分子生物学
分子生物学与神经分子生物学
分子生物学(molecular biology ):从分子水平上研究生命现象物质基础的学科.研究细胞成分的物理、化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系,如遗传信息的传递,基因的结构、复制、转录、翻译、表达调控和表达产物的生理功能,以及细胞信号的转导等.
分子生物学中最基本的技术是蛋白质的表达和纯化.首先是编码目的蛋白的DNA序列被克隆(用PCR技术和限制性内切酶)到作为表达载体的质粒中.随后构建好的质粒被引入到宿主细胞.编码序列在质粒上的特殊的启动子元件的驱动下,被宿主细胞的表达系统所表达.质粒上通常还带有抗生素抗性标签以便于质粒筛选.
质粒可以被插入到细菌或动物细胞.外源DNA被引入细菌被称为转化,可以通过电穿孔法、微注射法、正吸收和融合来实现;外源DNA被引入真核细胞,如动物细胞,被称为转染,转染技术包括磷酸钙法、脂质体法和一些有专利权的商用转染试剂.DNA也可以以病毒或病原菌为载体被带入宿主细胞;应用这种病毒或病菌的转染技术于细胞时,用术语来说就是“对细胞进行转导(transduce)”.
多聚酶链式反应(PCR)是一项用于体外复制DNA的极为通用的技术.简而言之,PCR技术可以使单链DNA被复制数百万次,也允许用事先确定好的方式对被复制的DNA序列进行改动.例如,PCR技术可以用于引入限制性酶切位点,或者对特定的DNA碱基进行突变(改变).PCR技术还可以用于从cDNA文库获得特定的DNA片断,或者从另一个角度,用于判断一个cDNA文库中是否含有特定的DNA片断.
凝胶电泳是分子生物学最主要的一项技术.其基本原理是:DNA、RNA和蛋白质可以用电场来进行分离.在琼脂糖凝胶电泳中,DNA和RNA可以被琼脂糖凝胶按其分子大小进行分离.同样,蛋白质可以被SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)按分子量大小分离;此外,蛋白质还可以由于所带电荷的不同被等电聚焦电泳分离.
分子生物学中最基本的技术是蛋白质的表达和纯化.首先是编码目的蛋白的DNA序列被克隆(用PCR技术和限制性内切酶)到作为表达载体的质粒中.随后构建好的质粒被引入到宿主细胞.编码序列在质粒上的特殊的启动子元件的驱动下,被宿主细胞的表达系统所表达.质粒上通常还带有抗生素抗性标签以便于质粒筛选.
质粒可以被插入到细菌或动物细胞.外源DNA被引入细菌被称为转化,可以通过电穿孔法、微注射法、正吸收和融合来实现;外源DNA被引入真核细胞,如动物细胞,被称为转染,转染技术包括磷酸钙法、脂质体法和一些有专利权的商用转染试剂.DNA也可以以病毒或病原菌为载体被带入宿主细胞;应用这种病毒或病菌的转染技术于细胞时,用术语来说就是“对细胞进行转导(transduce)”.
多聚酶链式反应(PCR)是一项用于体外复制DNA的极为通用的技术.简而言之,PCR技术可以使单链DNA被复制数百万次,也允许用事先确定好的方式对被复制的DNA序列进行改动.例如,PCR技术可以用于引入限制性酶切位点,或者对特定的DNA碱基进行突变(改变).PCR技术还可以用于从cDNA文库获得特定的DNA片断,或者从另一个角度,用于判断一个cDNA文库中是否含有特定的DNA片断.
凝胶电泳是分子生物学最主要的一项技术.其基本原理是:DNA、RNA和蛋白质可以用电场来进行分离.在琼脂糖凝胶电泳中,DNA和RNA可以被琼脂糖凝胶按其分子大小进行分离.同样,蛋白质可以被SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)按分子量大小分离;此外,蛋白质还可以由于所带电荷的不同被等电聚焦电泳分离.
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