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抗生素基因的作用是作为什么?用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因

来源:学生作业帮 编辑:搜狗做题网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/05/02 06:57:41
抗生素基因的作用是作为什么?用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因
抗生素基因的作用是作为什么?用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因
分子克隆的过程中,TRANSFORMATION实验中成功摄入并且表达靶向质粒的细菌,由于靶向质粒中抗生素基因的存在,因此可以在添加有抗生素的培养基中存活.而未曾摄入表达靶向质粒的细菌本身缺乏抗生素基因,从而被杀死.
因此达到筛选受体细菌是否导入目的质粒的目标.
而进一步在TRANSFECTION的过程中,质粒与细胞结合,经过RECOMBINATION整入受体细胞的基因组内.而作为质粒一部分的抗生素基因也一并整入,当然这个抗生素基因通常不是TRANSFORMATION中的抗生素基因了,而是另外一个.暂且命名TRANSORMATION的是抗生素A,TRANSFECTION的是B.
因此基于同样的道理,在TRANSFECTION结束以后,受体细胞开始在含有抗生素B的培养基中筛选,不含抗生素的被筛选出,逐步凋亡浮出被洗涤掉,筛选维持2-3个星期之后,就得到了导入目的基因的受体细胞.
举例比如说通常用的质粒,一般带有抗抗生素基因A,一般是ampicillin resistence gene,用于TRANSFORMATION筛选,另外还携带有抗抗生素基因B,一般是neomycin resistence gene或者是ZEOMYCIN resistence gene,用于TRANSFECTION筛选.