转化后挑取含有目的片段的单菌落摇菌扩增以后划盘子,几天后挑取部分菌落做PCR无带,不知是何原因?

来源：学生作业帮编辑：搜狗做题网作业帮分类：生物作业时间：2024/04/29 22:31:12

转化后挑取含有目的片段的单菌落摇菌扩增以后划盘子,几天后挑取部分菌落做PCR无带,不知是何原因?
划盘子后剩余的菌液提质粒测序结果与预期的片段相同，通用引物和自身引物开始都能得出很亮的带，而且质粒酶切后切成两段，也与预期结果相同大小，PCR的阳性对照出现正确结果，目的片段与载体脱离还是保留的菌种失活?

如果你确认 “转化后挑取含有目的片段的单菌落”这个步骤正确的话,就是你的PCR出问题了么,继续扩增便可.
目的片段与载体脱离还是保留的菌种失活? 应该都不会.我认为你的PCR体系除了问题,换一组酶和buffer,提一下模板,重做吧,会出来的.

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